蔡司光学、激光共聚焦、电子和 X 射线显微镜|我们如何选择一台适合自己的显微镜——光学部件的选择
时间:2022-10-01 阅读:777
显微镜的种类,包括正置/倒置、宽场显微镜、超高分辨率显微镜、激光共焦显微镜等等,不知道大家有没有认真听讲。今天给大家带来的是显微镜光学部件的介绍。
显微镜不同种类的光源
在评价显微镜光源优缺点前先介绍光源照明的两个重要指标参数:
1、显色性
● 光源的显色性,就是灯泡让物体呈现『真实颜色』的能力,通常用Ra表示。光源的显色性越好,光谱连续性就越接近太阳光,颜色还原越好。
2、色温
● 黑体从零度(-273℃)开始加温后所呈现的不同颜色。计量单位为“K”(开尔文)。因为背景颜色影响观察样本的色彩还原度,所以不同的色温适用的观察对象不同。
早期的显微镜依靠油灯或自然光等外部光源,虽然显色性好,但可控性差。现代显微镜通常使用可以被控制的整体光源,主要有卤素灯、汞灯、氙灯、LED灯等,那么我们在购买显微镜时该如何选择光源,他们的区别是什么?
1、卤素灯光源
● 卤素灯光谱和日光接近,显色性好,色温颜色偏暖黄。在观察某些物质时需借助色温转换片。卤素灯泡的寿命较短,一般使用1000小时亮度就会降低到原先的一半左右。
2、高压汞灯
● 高压汞灯光源(UHP,UMPRD,UHE,SHP等)工作时,电流激发高压汞蒸汽发光。色温偏冷白,在观察某些物质时需借助色温转换片,光强度高,适于荧光、若荧光观察,使用时需要预冷预热,寿命短在200小时左右,更换成本高。
3、高压氙灯
● 光谱和日光接近,并且亮度高。寿命比较长,是比较好的光源之一。但危险系数高,易爆炸,使用时要注意其强紫外的伤害性。
4、新型LED光源
● LED光源体积小,亮度高,光强连续可调。使用寿命长,有效时间可达到50000小时以上;不需要预热,即开即用,响应时间快;节能环保不存在对人体和环境污染的风险;显色性好,适合明场及荧光成像,是优选光源。ECHO正倒置一体显微镜采用的新型LED光源。
二、聚光镜的选择及调节
聚光镜又名聚光器,通常装在显微镜载物台的下方。聚光镜功能是用来弥补光亮的不足并适当改变光的性质,将光线聚焦于被检物上,得到的照明效果。按级别可分为:长工作距离聚光镜、高分辨率聚光镜和多功能聚光镜。
1、长工作距离聚光镜
● 工作距离长,NA值较低,适用于低倍物镜。并适合观察培养皿等较厚的物体。
2、高分辨率聚光镜
● 工作距离短,NA值较高,适用于高倍物镜。适合观察切片等较薄的物体。
3、多功能聚光镜
● 可以进行相差、暗场、偏光、微分干涉等观察方式。根据观察需要进行选择。
聚光镜的调节:
聚光镜孔径光阑(即:光圈)开的大小与物镜上标识的数值孔径有对应关系。应开到物镜数值孔径的75%-85%。每一支物镜都有类似这个的标识,例如:10X/0.25、40X/0.65,这其中的0.25 以及0.65即为物镜的数值孔径,聚光镜的光阑调节要遵照这些去调节。